Как да направим последователно развъждане: 9 стъпки

В химията разреждането се нарича процес, в резултат на което концентрацията на веществото се намалява в разтвора. Последователното разреждане се състои от повтарящи се разреждания, което ви позволява бързо да намалите началната концентрация. Този метод се използва в експерименти, в които се изискват високо разредени разтвори с точна концентрация, често се определя от логаритмична скала или когато е необходимо да се намери плътността на бактериите. Последователното размножаване се използва широко в експериментални науки, като биохимия, микробиология, фармакология, физика.

Стъпка

Метод 1 от 2:

Последователно разреждане

един. Изберете подходящ разтворител. Когато развъждането е много важно да изберете правилния разтворител или буфер. Много решения могат да бъдат дисоциирани с дестилирана вода, но не винаги е така. Ако разреждате бактерии или други клетки, ще ви е необходима подходяща културна среда. Избраният буфер трябва да се използва с всички последователни разреждания.

Ако не сте сигурни, че е по-добре да използвате като буфер, попитайте учителя или потърсете необходимата информация в интернет: може би някой вече е приготвил такова решение.

Изображение, озаглавено Направете серийни разреждания Стъпка 2

2. Пригответе няколко тръби с 9 милилитра буфер. Тези тестови тръби ще играят ролята на развъдните заготовки. Вие поставяте разредения модел в първата тестова тръба и след това последователно прехвърляте разтвора в следните епруветки.

Преди започване на работа е полезно да маркирате всички използвани епруветки, използвани за да не объркват решенията в процеса на размножаване.

Всяка следваща тестова тръба ще съдържа 10 пъти по-малко концентриран разтвор от предишния. В първата епруветка концентрацията на разтвора ще бъде 1:10, във втория - 1: 100, в третата - 1: 1000 и т.н. Определете предварително колко сте необходими за разреждания и пригответе подходящия брой тръби.

Изображение, озаглавено Направете серийни разреждания Стъпка 3

3. Пригответе епруветка с най-малко 2 милилитра от неразредени разтвори. За постоянно разреждане този метод изисква най-малко 1 милилита на неразрешен разтвор. Ако има само 1 милилитър, няма да имате неразделно решение. Напишете в тази епруветка Вж (неразвито решение).

Преди всяко размножаване, разбъркайте внимателно разтвора.

Изображение, озаглавено Прави серийни разреждания Стъпка 4

4. Прекарват първото разреждане. Тип 1 милилил неразреден с епруветки в пипета Вж и го счупете в епруветката с марка 1:10, който съдържа 9 милилитра буфер, след което се разбърквате добре. В резултат на това ще получите разтвор, разреден с 9 милилитра буфер. Така концентрацията на решението ще намалее в 10 пъти.

Изображение, озаглавено Направете серийни разреждания Стъпка 5

пет. Подгответе следното решение. За второто последователно размножаване приемайте 1 милилитър разтвор от епруветката 1:10 и добавете към 9 милилитра буфер в тестовата тръба 1: 100. Преди това смесвайте разтвора в епруветката 1:10. След като добавите разтвор в епруветка 1: 100, Разбъркайте добре съдържанието си. В резултат на това размножавате разтвор от епруветка 1:10, И ще имате ново решение с концентрация от 1: 100.

Изображение, озаглавено направете серийни разреждания Стъпка 6

6. Ако е необходимо, продължете да размножавате решение. Този процес може да се повтори толкова, колкото не достигате желаната концентрация. Ако експериментът трябва да определи зависимостта от концентрацията, е възможно последователно приготвяне на разтвори 1, 1:10, 1: 100, 1: 1000.

Метод 2 от 2:

Изчисляване на коефициента на размножаване и крайната концентрация

един. Определяне на коефициент Разреждане на крайното решение. За да направите това, умножете всички последователни коефициенти на развъждане. Съответната формула има следната форма: Д_T = D_един X D₂ X D₃ x ... x d_Н, където Д_T - общ коефициент на размножаване, Д_Н - коефициент на разреждане.

Да предположим, че 4 пъти провежда развъдник с съотношение 1:10. Заменете този коефициент във формулата и получете d_T = 10 x 10 x 10 x 10 = 10.000.
Така, след последното размножаване в четвъртата епруветка, разтвор е 1:10.000, т.е. крайното решение ще бъде в 10.000 по-малко концентрирани от оригинала (неразвити).

Изображение, озаглавено направете серийни разреждания Стъпка 8

2. Определя концентрацията на разтвора след размножаване. За да се определи концентрацията на разтвора след последователно развъждане, е необходимо да се знае първоначалната концентрация. Използвайте формулата ° С_Краен = C_{Източник}/ Д, където ° С_Краен - концентрация на разведения разтвор, ° С_{Източник} - оригинална концентрация, Д - определено над коефициента на размножаване.

Пример: Ако концентрацията на първоначалния разтвор е 1.000.000 клетки на милилитър и коефициентът на размножаване е 1.000, какво е равно на концентрацията на крайното решение?

Ние използваме формулата:

° С_Краен = C_{Източник}/ Д

° С_Краен = 1.000.000/1.000

° С_Краен = 1.000 клетки на милилитър.

Изображение, озаглавено направете серийни разреждания етап 9

3. Проверете измерението. Когато извършвате каквито и да било изчисления, трябва да сте сигурни, че сте получили правилните единици за измерване. Ако сте започнали от броя на клетките на милилитър, уверете се, че резултатът се получава и в тези единици. Ако се изчислява в ppm (ppm), получената концентрация трябва да бъде изразена в промил.